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[인천대 생명공학실험2 A+] Plasmid extraction(플라스미드 추출) 실험결과 보고서

A+를 쉽게 받을 수 있도록 매우 정리가 잘 되어 있는 agar배지 및 Competent cell 제작 실험결과 보고서 입니다. LB(w/km) 배지, DNA extraction protocol, plasmid(플라스미드) 추출 방법, Harvesting, Resuspension, Lysis, Neutralization, DNA binding, Wash/Dry, DNA elution, Nanodrop 등에 대한 이론을 포함하고 있습니다. 이론 외에 실험결과왿 오차의 원인까지 포함한 고찰 및 결론 또한 체계적으로 꼼꼼히 적혀있습니다.
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최초등록일 2020.03.08 최종젿작일 2019.04
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[인천대 생명공학실험2 A+] Plasmid extraction(플라스미드 추출) 실험결과 보고서
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    소개

    A+를 쉽게 받을 수 있도록 매우 정리가 잘 되어 있는 agar배지 및 Competent cell 제작 실험결과 보고서 입니다.
    LB(w/km) 배지, DNA extraction protocol, plasmid(플라스미드) 추출 방법, Harvesting, Resuspension, Lysis, Neutralization, DNA binding, Wash/Dry, DNA elution, Nanodrop 등에 대한 이론을 포함하고 있습니다.
    이론 외에 실험결과왿 오차의 원인까지 포함한 고찰 및 결론 또한 체계적으로 꼼꼼히 적혀있습니다.

    목차

    1. Abstract
    2. Information
    3. Materials and Methods
    4. Result
    5. Discussion
    6. Conclusion
    7. Reference

    본내용

    Abstract
    LB w/km배지에서 키운 kanamycin 저항성 유전자를 갖는 형질전환된 E.coli를 DNA extracion 7단계를 이용해 추출하며 각 단계는 Harvesting, Resuspension (PD1buffer-RNase),Lysis (PD2 buffer), Neutalization(PD buffer 3),DNA binding(column), Wash/Dry(wash buffer-EtOH포함), Elusion(DW or TE buffer)으로 구성되어 있으며 추출한 DNA를 이용해 Nanodrop으로 DNA를 정량한다. 이때 A260,A280에서 흡광도를 측정해 A260/A280의 흡광도 값이 1.8-2.0일 경우 높은 순도의 DNA가 측정되었다고 판단하는데 2B-1튜브왿 2B-2튜브에서 각각 plasmid DNA의 농도 81.78, 89.24ng/㎕, 순도1.10, 1.15의 결과값을 얻었다. PEGFP-N1/SPD1 cell colony를 접종한 LB broth(w/km)의 색이 접종 직후 옅은 아이보리색에서 일주일 후 짙은 아이보리 색으로 변했으며 첫번째 샘플에서는 부유물이 없이 맑았으나 두번째 샘플에서는 하얀 부유물이 떠다녀 두번째 샘플이 다른 미생물에 의해 오염이 되었다고 판단했다.

    참고자료

    · Michael T. et al., Brock의 미생물학 11th, PEARSON 402-403
    · Reece et al., Campbell Biology Concept&Connection, 2011, PEARSON, p 21, 27,29, 442,443
    · Joanne M. Willey et al., Prescott’s Microbiology 9th, 2016,라이프사이언스, p 111-113, 192, 357
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