confocal microscopy

Abstract
이번 실험은 animal cell(293T HEK cell)을 transfection 시켜서
293T-EGFP transfection cell을 Confocal Microscopy를 이용해 관찰하고, confocal microscopy의 원리를 알아보는 실험이었다. 실험은 293T HEK cell4x105개를 counting 해서 T-flask에 분주하고 incubation 한 후 ① incubation 한 cell+fransfection mix(EGFP가 들어있는 것), ②incubation 한 cell+control mix(EGFP가 들어있지 않은 것)을 각각 만들어 36~48시간동안 배양하고 confocal microscope로 관찰하는 방식으로 진행되었다.
관찰결과 ①의 flask에서는 초록색 형광이 나타나는 것을 확인할 수 있었고 control 로 만든 ②에서는 형광이 나타나지 않은 cell의 형태만 나타나는 것을 확인 할 수 있었다.

Introduction
◉animal cell culture
293T cell은 human embryonic kidney 293 cell로 HEK 293, 293 cell, HEK cell 등으로 불린다. 이 cell line은 배양이 쉽고 transfection이 잘 되어 cell biology 연구에서 오랫동안 널리 사용되어왔다. 또한 유전자 치료법을 위한 바이러스왿� 단백질을 생산하는데에도 응용된다. 293T cell은 adenovirus DNA를 transformation하여 human embryonic kidney cell의 chromosome 19에 viral genome을 incoporation하여 제작한 cell line이다.
◉ Transfection

<Figure1. Transfection>
Transfection이란 외래의 DNA를 eukarayotic cell에 주입하는 것을 의미하는 것으로, 간단히 말해 외부 DNA를 cell 에 넣어 다른 특징을 만드는 것을 말한다. 일반적으로 cell에 일시적으로 구멍을 만들어 외래의 DNA가 도입될 수 있게 한다. 주입되는 DNA는 주로 supercoiled plasma DNA이고 siRNA가 도입되기도 한다.