미생물 실험 결과 report Transformation of plasmid DNA

Materials
- Transformation : DH5α Competent cells, PACYCduet-ADH-his DNA pre mini kit,
따뜻하게 데운 LB liquid medium, ice box, constant temperature water bath,
shaking incubator, micro pipette, 항생제 Chloramphenicol

- Gel electrophoresis : pYLEX1-ohyA-his DNA, Agarose Gel, Running Buffer(1XTAE),
Loading dye(6X), size marker(1Kb DNA ladder), micro pipette, EtBr, UV transilluminator

1. DH5α Competent cell
Transformation의 Competent cell(수용세포)로 사용되는 Microbe는 E. coli 이다.
이 미생물은 위해미생물이 아니며, 실험실에서 cloning에 사용되기 위해 D.Hanahan에 의해 개발되었다. lacZ Delta M15 mutation 이 일어나서 항생 blue-white screening이 되는 등의 특징을 가진다.
- From MicrobeWiki, the student-edited microbiology resource

2. PACYCduet-ADH-his DNA pre mini kit Transformation 실험에 사용할 Plasmid DNA는 시판되는 PACYCduet-ADH-his DNA pre mini kit이다. PACYC duet의 제한 효소 부분에 ADH gene을 넣고 ligation하여 Vector를 완성한다. 특히 PACYCduet-ADH-hisDNA에는CmR이(항생제Chloramphenicol에대한저항성을가지게하는gene)존재한다.
3. pYLEX1-ohyA-his DNA
Gel electrophoresis 실험에 사용할 DNA는 pYLEX1-ohyA-his DNA이다. pYLEX1 부분은 대략 7000bp(base pair ; 염기쌍)이고, ohyA-his 부분은 대략 17000bp이다.