Transformation

실험목표 : Recombinant DNA를 host cell에 transformation(형질전환) 하는 것이 이 실험의 목적이다.
실험방법 : ① Competent-cell에 반응물(2ul)을 부드럽게 섞어준다.
② 얼음에서 20분간 반응
③ 42℃에서 1분 반응
④ 바로 얼음에서 2분간 반응
⑤ 멸균된 배지(LB 배지)를 1000ul를 넣고 37 ℃incubator에서 40분간 키운 후,
⑥ 항생제가 들어 있는 배지에 spreading한다.

<중 략>

Agrobacterium은 토양중에 있는 Gram(-) 박테리아로써 식물의 상처부위에 침입하 여 Corwn gall이라는 종양이나 Hairy rout를 형성하며 식물에 대해 광범위한 기주 범위를 가지고 있다. 특이한 점은 이 박테리아가 가지고 있는 Ti plasmid나 Riplasmid에 특별한 DNA부분(T-DNA)이 식물체에 감염과 동시에 자연적으로 식물 체의 genome속으로 들어가서 발현되다. 이 T-DNA는 Agrobacterium이 자신의 영양원으로 이용하는 아미노산 유도체인 Opine의 분비왿� 생산에 관여하는 효소를 Coding한다.

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이번주는 2개의 실험을 하였고 정말 과정도 간단하고 뭘했는지 기억도 잘안났지만 레포트를 적으면서 2개의 실험이 연관성이 있다는 것을 알게 되었다. 얼음에 옮기기전에 시간이 약간 지연된 것만 빼면 제대로 진행되었다고 생각한다. 그리고 형진전환과 관련된 자료를 보고 궁금증과 오차의원인을 생각해보았다. 내가 조사한 Transformation 한 후의 결과 가 3가지로 나뉘었다.
① Plasmid가 들어가지 않은 경우
② Plasmid가 들어갔으나 plasmid에 원하는 유전자가 들어가지 않은 경우