[기기분석] TLC를 이용한 아미노산의 정성분석

1) 정의: 흡착능·분배계수·휘발성 또는 이온교환능의 차 등을 이용해 혼합물을 분리·정제하는 조작법의 하나 미량 물질의 분석수단으로 이용됨
2) 원리 : 이동상은 시료를 함유한 고정상으로부터 시료를 녹여내는데, 용질이 여기를 천천히 지나가 새로운 고정상에 닿으면, 두 상에 대한 물리적·화학적 상호작용의 정도에 따라 흡착 또는 분리가 일어남. 고정상과 이동상의 계면에서는 흡착제왿� 친화성이 강한 성분일수록 용출되어 이동하는 비율이 적어지고, 고정상 속에 머무는 비율이 커짐 → 친화성에 근소한 차가 있으면 이동속도에 차이가 생겨 혼합물의 분리가 가능
※ 구성요소
• 고정상(stationary phase) : 물질에 대한 친화성(유지력)이 있고 이동하지 않는 상
• 이동상(mobile phase) : 고정상에 대해 상대적으로 이동하여 나가는 기체 또는 액체의 상

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발색시약 : 전개 후 성분의 분리를 눈으로 보고 확인할 때 유색성분이면 문제가 없으나, 색이 없는 성분에서는 적당한 발색시약을 분무하여 해당성분의 반점의 위치를 확인함
① 황산 : 분무 후 전개판을 120℃ 정도로 가열하고 유기물을 검게 만듬
② 삼염화안티몬-클로로포름용액(포화) : 스테로이드, 비타민 A등을 푸른색으로 발색시킴
③ 요오드, 브롬 : C=C, P=O, P=S 등의 이중결합에 흡수되어 갈색을 나타냄
④ 질산은-에탄올 용액 : AgNO3 0.5% 용액은 유기인제, 2% 용액은 PCB의 확인에 쓰임
⑤ pH 지시약 : pH 지시약의 메탄올 용액은 산, 염기의 확인에 쓰임

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이번 실험에서는 TLC를 이용하여 화학적으로 구조가 비슷한 아미노산을 분리하고 표준물질과 다른 시료의 아미노산을 비교, 분석해보았다. 크로마토그래피는 혼합물을 분리·정제하는 조작법의 하나로 우리가 이용한 TLC는 분배크로마토그래피의 일종인 얇은막크로마토그래피이다. 얇은막크로마토그래피는 유리판 위에 흡착제의 얇은 층을 만들어 이것을 고정상으로 하고, 유기용매를 전개유동상으로 한 크로마토그래피를 말한다.