DNA 클로닝 실험 레포트

1. Introduction
DNA Technology는 생명체의 특성을 이해하여 이를 유용하게 사용하는 것이다. DNA Technology는 각종 의약품에서부터 형질 전환 식품까지 다양한 곳에 쓰인다. 이번 실험에서는 PCR, Plasmid mini-prep, Restriction enzyme cut & DNA finger printing의 세가지 실험을 통해 DNA Technology에 대한 이해를 넓혀 보고자 하였다.
가장 먼저 PCR을 통해서 우리가 필요한 DNA를 대량으로 증폭시키는 방법을 알아보았다. PCR이란 시험관 안에서 짧은 DNA부위를 여러 번 복사하면서 복제 과정을 자동화 한 것을 말한다. PCR은 DNA서열의 고유함 덕분에 표적서열만을 빠르게 증폭시키는데 매우 효과적이다. 이는 PCR이 개인의 신원 확인에서 질병 탐지까지 폭넓게 응용되는데 큰 기여를 했다. (1) 이번 실험에서는 플라스미드 내부에 삽입된 DNA의 유무를 알 수 있는 colony PCR을 진행하였고 이를 통해 재조합된 플라스미드를 가지는 숙주세포를 구별할 수 있다. 이때 주형 DNA는 숙주세포가 용해되어 나온 플라스미드로 사용한다.
이때, 재조합 되기 전 플라스미드를 세균으로부터 추출 하는 것을 prep한다고 하는데, 두 번째 실험에서는 원하는 플라스미드를 얻기 위한 prep과정을 직접 해보았다. 여기서 플라스미드란 세균들이 주된 염색체 이외에도 가지고 있는 더 작은 원형의 염색체들을 말한다. 플라스미드는 이번 실험에서 벡터, 즉 외부의 DNA를 세포 내로 도입하는데 필요한 DNA로써 사용되었다.
세번째 실험은 두 번째 실험을 통해 추출해 낸 플라스미드를 제한 효소를 통해 삽입된 DNA가 제대로 들어가 있는지 확인해 보는 실험이었다. 제한 효소란 특이적인 염기서열을 인식해서 염기서열을 자르는 역할을 하는데, 이는 박테리오 파지라는 바이러스가 세균을 공격하는 것을 막기 위해 박테리오 파지가 주입한 것과 같은 DNA를 자르는 역할에서 비롯되었다.