[미생물씄험]순수 분리 및 배��

1. 실험 목적

가. 실험 목표
미생물에 대한 연구 시, 미생물의 생태적, 생화학적, 분자생물학적 등 다양한 생물학적 특징을 밝혀야 하며 이를 위해 목표하는 미생물을 순수 분리하고 배��할 필요가 있다. 다른 종류의 생명체가 섞여 있지 않은 단일 종의 미생물의 배��을 순수 배��이라 하며, 적절한 환경에서 다른 미생물의 노출 및 오염 없이 배��해야 한다.
미생물의 배��은 미생물의 먹이가 되는 배지(media)를 이용하며, 배지의 상태에 따라 액체 배지왿� 고체 배지로 나눈다. 본 실험에서는 Luria Bertani media (이하 LB 배지)를 이용하여 실험하였으며, LB배지는 균 배��액의 생장에 필요한 질소, 탄소, 비타민, 및 무기염류 등을 제공한다.
실험에서는 배지에 균 배��액을 streak plate method(획선 평판법)왿� spread plate method(표면 도말법)로 접종하여 배��하였다. Streak plate method는 single colony를 얻기 위함이며, spread plate method는 평판 위에 희석된 소량의 배��액을 표면에 주입하여 배��한 결과로 생성된 colony의 개수를 통해 접종한 용액 1㎖당 미생물의 개체 수를 파악하는 것이 목적이다.

2. 실험이론

가. 미생물 배지
미생물을 증식시키기 위해서는 탄소원, 질소원, 무기이온, 아미노산, 비타민, 증식 필수 영양인자 등의 영양 성분이 필요하며, 특히 세균류는 다양한 영양 요구성을 나타낸다. 예를 들어 무기물로만 구성된 배지에서 자랄 수 있는 종류가 있는 반면, 아미노산, 비타민과 복잡한 유기화합물이 첨가된 배지에서 자라는 미생물 종류도 있다. 이러한 영양 요구성은 세균의 종류에 따라 각기 다르다. 실험실에서 미생물의 배��에 필요한 각종 영양분을 섞어 인위적으로 만든 혼합물을 배지(medium)이라고 하며, 균 종에 따라 필요한 영양 성분이 다르므로 균의 특성에 맞게 적절한 배지를 만들어야 한다.