단백질정량 실험 예비왿� 결과 레포트입니다.

1. Subject: 단백질 정량 분석

2. Date: 2021.11.30.(화)

3. Purpose: 여러 방법으로 절대적인 단백질의 농도를 구해볼 수 있다.

4. Introduction:
(1) 단백질 정량의 개념과 목적
① 개념
-시료 내에 포함되어 있는 아미노산이나 단백질의 농도나 양을 분석하는 실험이다.
-보통 켈달법을 이용하여 질소를 정량한 후 단백질의 농도를 측정한다.
*켈달법: 질소를 황산과 같이 가열하여 암모니아로 바꾼 후 약산에 흡수시켜 정량하는 방법이다.
② 목적
-단백질이 얼마나 잘 추출되었는지 단백질의 양을 알기 위함이다.
-이를 통하여 단백질의 효율이 얼마 정도 되는지 알 수 있다.

(2) 단백질 정량 방법의 종류왿� 원리
-UV(280nm)에서 흡광도 측정을 통한 정량(Beer-Lambert law도 함께 조사)
① 개념: 단백질 자체가 갖고 있는 자외선 흡광 현상을 이용하여 단백질을 정량하는 방법이다.
② 원리: 단백질의 흡광은 280nm에서의 자외선에서 최대값을 갖는다.
-단백질을 구성하고 있는 아미노산인 Tyr잔기나 Trp잔기가 많을수록 자외선에서의 흡광이 많아진다.
->Tyr잔기나 Trp잔기의 개수를 통하여 자외선 흡광계수를 측정하여 단백질의 농도를 정량할 수 있다.

<중 략>

-Bradford assay
① 개념: 분광기를 이용하여 용액의 단백질 농도를 측정하는 단백질 정량법이다.
② 원리: Coomassic brilliant blue G-250 염색약의 흡광도 차이를 이용한다.
-산성 조건에서 붉은 색의 염색약이 단백질과 결합하면서 푸른색으로 변한다.
->G-250-단백질 복합체가 형성되는 과정에서 붉은 색의 염색약이 단백질이 이온화될 수 있는 부분에 전자를 준다.
->단백질의 중성 상태를 제거하여 hydrophobic 부분을 노출시킨다.
->hydrophobic 부분이 염색약과 반데르발스 힘을 통하여 비공유결합을 형성한다.