[유전공학실험] A+레포트 / DNA클로닝과 형질전환(Ligation and transformation) 실험레포트

2. DNA 재조합 과정에서 사용되는 효소
- 제Ⅱ형 제한효소 : 특정 염기서열을 인식하여 DNA를 절단한다. - DNA ligase : 두 개의 DNA의 5’-P왿� 3‘-OH를 연결해준다. - Alkaline phosphatase : DNA 말단에 있는 인산기를 제거하여 self-ligation을 방지해준다. - DNA polymerase Ⅰ : DNA의 3‘말단에 뉴클레오티드의 단계적인 첨가를 일으켜 DNA를 합성한다. - 역전사효소 : RNA를 주형으로 하여 DNA 사본을 만들어낸다. - 박테리오파지 λ 핵산말단분해효소 : 단일가닥의 3‘말단을 노출시키기 위해 이중가닥의 5’말단에서 뉴클레오티드를 제거해준다. - polynucleotide kinase : DNA를 연결하거나 표��하기 위해 폴리뉴클레오티드의 5‘-OH 말단에 인산기를 첨가해준다. - 말단전달효소(terminal transferase) : 선형 이중가닥의 3‘-OH 말단에 상동중합체의 꼬리를 첨가한다. - 핵산말단분해효소 Ⅲ (exonuclease Ⅲ) : DNA가닥의 3‘-OH의 뉴클레오티드기를 제거한다.
(2) 벡터
벡터(vector)는 자신은 직접 병을 일으키지는 않으나 질병을 일으키는 병원균을 한 숙주에서 다른 숙주로
전달하는 생명체를 의미한다. 예를 들어 말라리아 병원균을 옮기는 모기가 바로 벡터이다. 분자생물학이나
유전공학에서 의미하는 벡터는 플라스미드나 박테리오파지왿� 같은 DNA로 세포 형질전환을 통해 특정 유전자나 DNA를 자신에게 삽입시켜 재조합 DNA를 만든 후 이것을 숙주세포로 전달하여 많은 수로 복제될
수 있도록 하거나 단백질로 발현될 수 있도록 하는 DNA 운반체를 의미한다. 1. 벡터의 종류
① 클로닝 벡터
클로닝 벡터는 외부 DNA를 숙주세포로 도입한 후 숙주세포 내에서 복제하여 벡터 자신의 DNA왿� 삽입된
외부 DNA를 많은 수의 사본으로 생산하는 벡터를 의미한다. 주로 재조합 DNA의 제작이나 염기서열 결정과 같은 목적을 위해 순수 DNA를 증식시켜 분리 및 정제를 할 때 사용된다.