DPPH assay

Ⅰ. Introduction
1. 실험원리
1) 활성산소
활성산소종(ROS)은 산소원자를 포함한, 화학적으로 반응성 있는 분자이다. 생물체내에서 생성되는 산소의 화합물로 생체 조직을 공격하고 세포를 손상시키는 산화력이 강한 산소이다. 분자들은 산소이온 그리고 과산화수소를 포함하고 있으며, 짝지어지지 않은 전자 때문에 반응성이 매우 높다. 그 예로 peroxides, superoxide, hydroxyl radical, singlet oxygen, 그리고 alpha-oxygen이 있다. 활성산소종은 산소의 정상적인 대사작용에 의해서 자연스럽게 생기며, 세포신호왿� 항상성에 중요한 역할을 한다. 활성산소종의 농도는 자외선이나 높은 열에 노출되는 것처럼 환경적인 스트레스(UV 또는 열 노출)로 인하여 매우 빠르게 증가할 수 있다. 이는 세포 구조에 상당한 손상을 초래할 수 있다. 이것이 누적되면 산화적 스트레스로 이어진다. 활성산소종의 생산은 식물의 스트레스 요인 반응에 의해 강하게 영향을 받는데, 이러한 활성산소종의 생성을 증가시키는 요인은 가뭄, 염도, 추위, 영양 결핍, 금속 독성, UV-B 방사선을 포함한다. 활성산소종은 또한 전리 방사선과 같은 외인적인 요인으로도 생성될 수도 있다.

위 활성산소 분자들 중 가장 강력한 반응력을 갖는 물질은 히드록실라디칼이다. 원자 내의 전자는 자기 궤도를 갖고 각 궤도에는 서로 상반된 회전축을 갖는 두 개의 전자로 채워져 있다. 쌍을 이루지 않은 전자는 한 궤도에 한 개의 전자만이 자리 잡고 있는 상태이다. 라디칼(또는 free radical)이란 최외각에 하나 또는 여러 개의 쌍을 이루지 않는 전자(unpaired electron)을 갖는 물질로 이 구조는 극히 불안정한 형태이기 때문에 다른 분자왿� 재빨리 반응한다. 즉 라디칼들은 외각 전자각(shell)에 4쌍의 전자를 확보하므로 안정된 구조를 형성하려고 한다.