인천대학껓 일반생물학씄험 완충액의제조왿�산도측정, 단백질탄수화물지질검출 예비보고서

ㆍ실험 목적
- 수용액의 pH 측정법의 원리왿� 완충액에 있어서 pH 완충작용의 원리를 학습함으로써 생체 내에서 일어나는 수소이온 농도조절을 통한 생물체의 항상성 유지기작을 이해한다.

ㆍ이론
산(acid)은 용액에 수소이온을 제공하는 화합물이고 염기(base)는 수소이온을 받아들이는 화합물이다. 또 완충제(buffer)는 pH 변화를 최소화 하는 물질로, 수소이온이 과다하면 수소이온을 받아들이고 수소이온이 부족하면 수소이온을 내놓는다.
pH 척도 (pH scale), 산성도란 수용액에 들어있는 수소 온 (H+)의 양으로 결정되며, 수용액의 수소 이온 농도는 다음과 같이 pH로 표시한다. pH = -log[H+] = -log[H3O+] 범위는 0에서 14로, 0은 가장 강산, 14는 가장 염기성이다. pH 한 단위는 H+ 이온 농도의 10 배수 변화를 나타낸다. 생체 내에서 일어나고 있는 생화학적 반응은 주로 pH 7.4 근처의 한정된 범위에서 일어나는데 이는 체내의 여러 완충제들에 의해 수소 이온 농도의 급격한 변화가 방지되기 때문이다.
완충제(buffer)는 일반적으로 약산과 그 짝염기로 이루어져 있으며 약산의 해리 반응인 HA ↔ H+ + A- 이때 HA를 산, A-를 그 짝염기라고 부르며 그 평형상수는 다음과 같다. Ka' = [H+][A-]/[HA] 여기서 log를 취하면 Henderson-Hasselbalch 식을 얻을 수 있다. pH = pKa' + log[A-]/[HA] 이 때 pH = -log [H+]이며, pKa'= -logKa'를 의미하고, 각 괄호는 몰 농도 (moles/L)를 의미한다.

ㆍ씄험재료
1) 소모성 재료 (1) 0.1 N HCI (2) 0.1 N NaOH (3) 0.1 M NaH2PO4 (4) 0.1 M Na2HPO4
2) 기기 (1) pH미터 (pH meter) (3) 50 mL tubes (4) pippette 20ml용과 0.2 ml pippette

ㆍ실험 방법
마이크로 파이펫 사용법
① 부피 조절 : 필요한 부피에 맞는 피펫을 선택 후 피펫의 부피 조절 부위를 돌려 원하는 양을 맞춘다.