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[생화학씄험]단백질 정량(Lowry 법)

"[생화학씄험]단백질 정량(Lowry 법)"에 대한 내용입니다.
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최초등록일 2023.03.21 최종젿작일 2023.03
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[생화학씄험]단백질 정량(Lowry 법)
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    소개

    "[생화학씄험]단백질 정량(Lowry 법)"에 대한 내용입니다.

    목차

    1. 실험 목적
    2. 실험 이론 및 원리
    3. 실험 기구 및 시약
    4. 실험 방법
    5. 실험 결과
    6. 토의 사항

    본내용

    1. 실험 목적
    가. 어수리의 추출 희석액으로부터 어수리의 단백질을 Lowry법으로 정량한다.

    2. 실험 이론 및 원리
    가. Lowry법
    알리성에서 단백질의 peptide 결합과 구리가 반응하여 Cu ^{2+} 이온을 생성하는 Biuret 반응의 원리를 이용한 것이다. 발색의 정확한 기작은 밝혀지지 않았지만 Cu ^{2+} 이온은 방향족 아미노산의 산화를 유도하여 phospomolybdotungstate를 푸른색의 heteropolymolybdnum으로 환원시킨다. 이러한 반응 결과 강한 푸른색을 생성하며 그 강도는 tryptophan과 lysine양에 영향을 받는다. 이 방법은 단백질의 농도가 0.01~1.0㎎/㎖의 경우에 측정가능하다.

    나. Biuret 반응
    두 개 이상의 펩티드 결합을 갖는 화합물들은 알리성 용액에서 황산구리로 처리하면 자주색을 띠는 물질을 생성한다. (색깔은 구리 원자왿 2개의 펩티드 사슬에서 오는 4개의 질소 원자들 사이에서 배위 화합물이 생기는 것으로 생각되고 있음) 수산화나트륨을 처리하는 이유는 ?OH에 의해 아미노기에 있는 수소 이온이 제거되어 구리 이온과 결합할 수 있도록 하기 때문이다.

    참고자료

    · 없음
  • Easy Ai 요약

    이 문서는 어수리의 단백질 함량을 Lowry법으로 정량하는 실험에 대한 보고서이다. 실험의 목적은 어수리 추출 희석액으로부터 단백질을 정량하는 것이었다. 실험 원리로는 Biuret 반응을 이용한 Lowry법을 사용하였는데, 이는 알리성 환경에서 단백질의 peptide 결합과 구리가 반응하여 Cu^{2+} 이온을 생성하고, 이 이온이 방향족 아미노산을 산화시켜 푸른색을 띠는 heteropolymolybdnum을 생성하는 원리이다. 실험에 사용된 기구왿 시약으로는 마이크로 피펫, 비커, 팁, 마이크로튜브, 용액 혼합기, tube rack, 분광광도계, 96 well plate, 어수리 용액, BSA 용액(standard), 증류수, 70% 에탄올, 2N Folin-Ciocailteau 용액 등이 있다. 실험 과정은 총 9단계로 구성되었는데, 어수리 추출 희석액과 BSA 표준 용액을 각각 희석하고, 시약을 가하여 반응시킨 뒤 분광광도계로 흡광도를 측정하였다. 표준 곡선을 이용하여 어수리 추출 희석액의 단백질 함량을 계산한 결과, 약 444.25 ㎍/㎖의 단백질이 함유된 것으로 나타났다. 실험을 진행하면서 피펫팅과 희석 기술을 익히고 정확성을 높이기 위해 신중한 태도로 임하였다. 하지만 실험 원리에 대한 이해가 부족하였다는 점이 아쉬웠다. 향후에는 실험 전에 충분한 이론 학습을 통해 실험의 원리를 숙지하고 실험에 임하는 것이 중요할 것으로 판단된다.
  • 자료후기

      Ai 리뷰
      어수리의 단백질 함량을 Lowry법으로 정량하는 실험을 수행하였으며, 실험 결과를 토대로 어수리 추출 희석액의 단백질 농도를 측정하였다.
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