Primary Cell culture & Subculture(쥐해부, 초대배��, 계대배��) 결과레포트

1)Primary Cell Culture(초대배��)
조직에서 가장 처음 세포를 분리하고 배양하는 과정을 말한다. 초대배��은 조직편을 1~2mm 정도로 굉장히 작게 잘라 그대로 배양하는 조직배양과 조직에서 원하는 세포만을 분리하여 배양하는 분리세포 배양이 있다. 생체에서 직접 분리한 세포이기 때문에 대게 분화능을 가지고 있고 정도에 따라 짧은 기간의 배양만 가능하다는 특징이 있다. 조직배양은 처음 유지하고자 했던 조직의 구조를 유지하면서 배양할 수 있고 여러 종류를 한번에 배양할 수 있다는 특성이 있다. 하지만 구성 세포의 배양조건이나 분화하는 속도에 차이가 있어서 장기간 배양할 수 없다는 것이 단점이다. 이왿� 달리 분리세포 배양은 조직배양에 비해 굉장히 많은 cell을 한번에 얻을 수 있다는 장점이 있다. 하지만 시간이 지날수록 세포의 특성이 조금씩 바뀌기 때문에 주의하여야 한다.
인체 조직은 한 세포가 다른 세포왿� 유기적 관계를 이루며 존재하기 때문에 단일 세포만을 분리하게 되면 기존의 살았던 환경과 달라지게 되어 생장능이 달라질 수 있다. 이러한 점을 보완하기 위해 배양 시 다른 세포를 함께 사용하여 지지층을 같이 쓸 수 있도록 하거나 다른 세포를 미리 배양하여 순화시킨 배지를 사용하는 방법이 있다. 이때 지지층은 증식능은 잃고 대사능을 약간 유지하고 있는 것을 주로 사용하며 이곳에서 분비되고 있는 세포외기질과 성장인자에 의해서 초대배��의 효율을 높일 수 있다. 콜라겐과 같은 세포외기질을 배양용기 표면에 아예 도포되어 세포가 직접 닿지 않게 하는 dish도 존재한다. 이러한 용기 덕분에 배양하고자 하는 세포의 부착능력도 높여줄 수 있다. 또한 숙주로부터 유입되는 contamination을 줄이기 위해 초대배��에서 페니실린 등과 같은 항생제를 이용하는 경우도 있다. 혈청의 경우 동물유래물질이기 때문에 영향을 줄 수 있어 무혈청배지를 주로 사용한다.