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기기분석실험 HPLC

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최초등록일 2024.03.16 최종젿작일 2021.03
기기분석실험 HPLC 스탠다드 HPLC
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기기분석실험 HPLC
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    목차

    1. 실험목적
    2. 실험재료 및 실험방법
    3. 이론
    4. 결과 및 고찰

    본내용

    1. 실험목적 :
    HPLC를 이용햐여 약물을 정량할 수 있다.
    HPLC 사용법을 익힐 수 있다.

    2.실험재료 및 실험방법
    실험재료 : HPLC, metformin 스탠다드 용액, 이동상(D.W : MeOH = 70 : 30), C18(고정상)
    실험방법
    1) 이동상 D.W왿 MeOH를 70 : 30으로 섞어 제조한다.
    2) 이동상과 고정상을 확인한다.
    3) HPLC 전원을 켠다.
    [Mobile phase] D.W. : MeOH= 70 : 30
    [Column] C18 Column (5um, 4.6 mm * 150 mm)
    [Stop time] 6 min
    [Flow rate] 1mL/min
    [Injection volume] 20uL
    [Wavelength] 232 nm 로 프로그램으로 설정해 준다.
    4) 이동상의 기포를 제거해 준다.
    5) 시료를 주입한다.
    6) 기기 안정화 시킨다.
    7) Blank 측정한 뒤 standard왿 Sample을 넣어서 측정한 뒤 분석한다.
    8) 성분 분석과, 양을 분석한다.

    3.이론
    1) HPLC 구성
    (1) 탈기장치 : 유량과 압력에 영향을 줄 수 있는 이동상 중의, 용존산소, 질소, 기포
    등을 없애기 위해 사용하는 장치
    > 장비에 연결된 튜빙이 얇기 때문에 정확한 결과 값을 얻는데 영향을 끼쳐 기포를
    없애는 것이 매우 중요함.
    (2) 펌프 : 이동상을 주입부, 컬럼, 검출기까지 운송하기 위한 고압 펌프
    > 일정한 유속이나 압력을 유지하는 요소이며 정확한 결과값, 높은 재현성 도출에
    가장 필요한 부분이다.
    (3) 시료주입기 : 전개재(이동상)에 시료를 더해 컬럼으로 보내주는 역할을 한다.
    (4) 칼럼 : 시료의 분리가 일어나는 부분이다.

    참고자료

    · 고성능 액체크로마토그래피 (HPLC) 기본 개념 및 원리 [출처] 고성능 액체크로마토그래피(HPLC) 기본 개념 및 원리|작성자 Flor." 네이버 블로그, n.d.,
    · https://blog.naver.com/kimhaelee56/222295919303. 2021년 05월 23일 접속.
    · HPLC컬럼의 특성 1,2." 충인과학, n.d.,
    · http://www.choongin.com/html/bbs/board.php?bo_table=data&wr_id=49. 2021년 05월 23일 접속.
    · 고정상." 네이버 지식백과 식품과학기술대사전, n.d.,
    · https://terms.naver.com/entry.naver?docId=292250&cid=60262&categoryId=60262. 2021년 05월 23일 접속.
    · 이동상." 네이버 지식백과 화학용어사전, n.d.,
    · https://terms.naver.com/entry.naver?docId=608648&cid=50314&categoryId=50314. 2021년 05월 23일 접속.
    · 올바른 크로마토그래피 컬럼 선택 방법." 네이버 블로그, n.d.,
    · https://blog.naver.com/thermofisherkorea/222134396502. 2021년 05월 23일 접속.
    · 검량선." 네이버 지식백과, n.d.,
    · https://terms.naver.com/entry.naver?docId=3391264&cid=60289&categoryId=60289. 2021년 05월 23일 접속.
    · Trouble shooting Q&A ..." 네이버 블로그, n.d.,
    · https://blog.naver.com/soo322/90114455482. 2021년 05월 23일 접속.
    · 피크 테일링 발생 이유왿 해결방법 (1) Peak Tailing [출처] 피크 테일링 발생 이유왿 해결방법 (1)" 네이버 블로그, n.d., https://blog.naver.com/dikma_korea/221792013797.2021년 05월 23일 접속.
    · 피크 모양 불량." nacalai tesque, n.d.,
    · https://www.nacalai.co.jp/global/cosmosil_kr/FAQ/T1-T2.html. 2021년 05월 23일 접속.

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