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[분자생물학] gene cloning

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최초등록일 2004.10.12 최종젿작일 2002.09
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[분자생물학] gene cloning
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    목차

    Chapter 1. why Gene cloning and DNA Analysis are important
    1. Gene cloning & PCR
    2. Gene cloning & PCR이 중요한 이유

    Chapter 2. vehicles for gene cloning: plasmids and bacteriophages
    1. Plasmids의 기본 모양
    2. Size & copy number
    3. Conjugation & compatibility
    4. Plasmid classification

    Chapter 3. Purification of DNA from Living Cells
    1. Size에 의한 분리
    2. Conformation에 의한 분리
    3. plasmid amplification

    Chapter 4. Manipulation of purified DNA
    1. Manipulations enzyme
    2. restriction endonucleases
    3. Restriction endonuclease cleavage의 결과 분석
    4. DNA molecules size 판단하는 방법
    5. Ligation – joining DNA molecules
    6. Sticky ends를 blunt-ended molecule위에 놓는 방법

    Chapter 5. Introduction of DNA into Living Cells
    1. Transformation
    2. Recombinants

    Chapter 6. Cloning Vectors for E. coli
    1. pBR322
    2. pBR327 – a higher copy number plasmid
    3. pUC8 – a Lac selection plasmid4. pGEM3Z – in vitro transcription of cloned DNA

    본내용

    1971-1973년 사이의 genetic research를 통해 DNA 제조합 기술과 유전자 기술이 발전했고 유전자 복제의 과정의 핵심기술을 제공하게 되었다. Gene cloning(유전자 복제)이란 무엇인가 살펴보면 (1) 복제하고자 하는 gene이 포함된 DNA의 fragment를 둥근 DNA 분자인 vector에 넣어 chimera 혹은 recombinant DNA molecule이라고 한다. (2) vehicle 역할을 하는 vector는 bacterium의 host cell로 들어간다. (3) 그 속에 들어간 gene과 함께 vector들이 증식하여 여러 개의 copies들을 만든다. (4) host cell이 분열할 때 제조합된 DNA 분자가 자손에게도 전달된다. (5) 수많은 세포 분열 후 각 clone안에 제조합된 DNA분자의 copies들이 포함되어 있고 이 때 제조합된 DNA분자에 의해 gene이 “복제”되었다고 한다.

    참고자료

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