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생화학실험 레포트 - 식물 조직으로부터 단백질 추출 및 정량 (Protein extraction & quantification)

생화학실험 수강 당시 작성했던 레포트 이고, 해당 수업 A+ 받았습니다
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최초등록일 2025.03.10 최종젿작일 2019.09
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생화학실험 레포트 - 식물 조직으로부터 단백질 추출 및 정량 (Protein extraction & quantification)
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    소개

    생화학실험 수강 당시 작성했던 레포트 이고, 해당 수업 A+ 받았습니다

    목차

    Ⅰ. Introduction
    1) Lowry assay
    2) BSA proteins
    3) Bradford assay
    4) Bio-Rad DC Protien Assay
    5) Spectrophotometer

    Ⅱ. Experimental materials and Methods

    Ⅲ. Results

    Ⅳ. Discussion
    ⑴ 단백질 농도 계산 및 고찰
    ⑵ Tris-Mg/NP-40 buffer왿 E buffer 중 어떤 것이 더 효율적일까?

    Ⅴ. References

    본내용

    Ⅰ. Introduction
    -Experiment purpose :
    지난 실험 시간에는 단백질 추출을 위한 EZ buffer, Tris-Mg/NP-40 buffer를 제조하였다. 이번 시간에는 잎 조직에서 제조한 buffer들을 이용하여 total proteins을 분리하고, 잎 조직으로부터 분리한 단백질의 양을 Bio-Rad DC Protien Assay을 이용하여 정량하고자 하였다.

    -Experiment theory :
    ⑴ Lowry assay는 단백질 정량 분석법 중 하나로, 용액에 있는 단백질뿐만 아니라 건조된 시료에서도 이용될 수 있다. 이 방법은 Folin-Ciocalteau 시약에 의한 단백질과 알칼리성 구리왿의 반응으로, 포스포몰리브덴산-포스포텅스텐산 염들이 단백질에 있는 티로신과 트립토판들에 의한 환원 반응으로 생성된다. 두 아미노산의 함량은 단백질의 종류에 따라서 다르므로 1mg의 단백질에 대한 색의 세기가 일정하지 않고 standard curve을 결정하는 데 사용한 단백질이 나타나는 색의 세기왿 다를 수 있다. 그럼에도 이 방법은 단백질을 정제하는 과정에 있어서 단백질의 함량변화를 측정하는데 아주 유용하게 쓰인다.

    ⑵ BSA protein은 Bovine serum albumin의 약자로, 소로부터 유래된 serum albumin protein이다. 주로 단백질 농도의 기준으로 사용된다.

    ⑶ Bradford assay은 protein assay 방법 중 가장 빠르고 수행하기 쉬워 단시간에 여러 sample을 테스트할 수 있다.

    참고자료

    · 김해신. (2014). 생화학 실험서. (2판). 서울: 월드사이언스
    · 김영희. (2004). 생화학 실험서. 서울: 아카데미서적
    · 한국생화학회. (1997). 실험생화학. (3판). 서울: 탐구당, p.177
  • Easy Ai 요약

    이 문서는 Arabidopsis 식물 잎 조직에서 단백질을 추출하고 Bio-Rad DC Protein Assay를 이용하여 정량하는 실험을 수행한 보고서입니다. 실험 목적은 Tris-Mg/NP-40 buffer왿 E buffer를 이용하여 단백질을 추출하고 정량하는 것이었습니다. 실험 결과, Tris-Mg/NP-40 buffer왿 E buffer 모두에서 단백질이 추출되었으며, E buffer 사용 시 추출된 단백질의 양이 더 많은 것으로 나타났습니다. 그러나 실험 과정에서 일부 샘플의 흡광도 값이 표준 곡선 범위를 벗어나 정확한 단백질 농도 계산에 어려움이 있었습니다. 이는 샘플 희석 배수를 적절히 조절하지 못한 것이 주요 원인으로 분석되었습니다. 향후 실험 시 이러한 점을 보완하여 더 정확한 단백질 정량 결과를 얻을 수 있을 것으로 기대됩니다.
  • 자료후기

      Ai 리뷰
      단백질 추출 및 정량 실험을 수행하고, 실험 결과왿 고찰을 통해 실험 방법의 장단점을 분석하였습니다.
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