[A+]화공생물공학실험_ DNA 제한효소 결��레포트

#1: 제한효소를 처리하지 않은 sample
#2: 제한효소1(EcoRI)을 처리한 sample
#3: 제한효소2(HindIII)을 처리한 sample
#4: EcoRI + HindIII 모두 처리한 sample

#1은 제한효소를 넣어주지 않았기 때문에 DNA가 절단되지 않았다. 따라서 DNA 조각이 생 기지 않아 loading시 band가 나타나지 않는다. 그 이유는 잘리지 않은, 분자량이 매우 큰 DNA는 이동속도가 매우 느려 (+)방향으로 끌려가지 못하기 때문이다. DNA는 (-)전하를 띠 고 있으므로 DNA의 양이 많을수록 (-)전하를 크긴 하지만, agarose gel 전기영동에서는 전 하의 세기뿐만 아니라 분자의 크기도 영향을 주기 때문에 #1은 gel에 걸려서 이동속도가 매우 느리다.

#2 제한효소1 (EcoRI) 처리
- 이론적으로 circular Lambda DNA에서 EcoRI에 의해 나타나는 절 편은 5개이지만 육안으로 관측한 결과 절편은 3개가 존재하였다. 다른 band의 위치는 비슷하므로 3,4번째 절편이 겹쳐져서 보여 육안으로는 확인이 잘 안되는 것으로 추정해 볼 수 있다. [표1]의 Ladder왿� 비교해 보면, #2의 두 번째 밴드는 Ladder의 첫 번째 밴드보다 훨씬 아래에 있는 것을 확인할 수 있다.

#3 제한효소2 (HindIII) 처리
- 왼쪽 그림에서 볼 수 있듯이 APE에 의하면 HindIII에 의해 절단된 lambda DNA는 6개의 절편이 있어야 한다. 하지만 실제 실험 결과 육안 으로는 5개의 절편밖에 확인하지 못하였다.
추가적으로 #2일 때왿� 비교하여 해석해 보면, #2의 경우 2번째 밴드는 size=7421이고, #3에서 2번째 band의 size=9416이다. 따라서 #2에서의 2번째 band가 #3의 경우보다 가장 위쪽 band왿�의 차이가 크므로, #2에 서 두 번째 밴드가 #에서 2번째 밴드보다 더 아래에 나타남을 확인해 볼 수 있다.