[미생물학 실험 ]생화학적 검사를 통한 Staphylococcus spp.의 분리동정

3. 실험이론
1) 당 발효 (Carbohydrate Fermentation)
(1) 실험의 목적
세균은 다양한 종류의 탄수화물을 이용하는데 세균의 종류에 따라 이용가능한 탄수화물의 종류도 다르다. 따라서 특정미생물이 어떤 종류의 탄수화물을 이용할 수 있는가가 세균동정의 유용한 기준이 된다. 뿐만 아니라 탄수화물, 특히 당의 경로가 발효인지 호흡인지 또는 둘 다일 경우 어느 쪽이 우세한가 하는 것도 세균의 판정에 있어 중요한 기준으로 이용되고 있다.
발효현상을 알아보는 발효관의 하나인 Durham관을 이용하면 미생물의 발효에 의한 가스 발생의 유무를 확인 할 수 있으며, 발생되는 가스의 종류를 알아볼 때에는 Smith 발효관이라고 부르는 유리기구를 사용한다.
세균의 종류에 따른 당의 이용 과정과 양상이 어떻게 다른지 알 수 있다.
(2) 실험의 원리
만일 미생물이 특정한 당을 발효시킬 수 있다면 산이 생성될 것이며 가스가 생성될 가능성도 있다. 산의 존재는 배지에 첨가시킨 지시약(phenol red)에 의한 색 변화로 알 수 있으며, 시험관 내에서 가스가 형성되면 시험관 내부에 거꾸로 집어넣은 Durham관내에 가스가 축적되므로 쉽게 관찰 할 수 있다.
(3) 실험에 쓰이는 배지-포도당만 예로
이 실험에 이용되는 배지는 포도당과 충분한 양의 beef extract, 그리고 peptone을 포함함으로써 대부분의 세균이 필요로 하는 질소원과 광물질이 충분히 들어 있다. 동시에 발효산물이 산성인가 중성인가 알칼리성인가를 알아보기 위하여 phenol red를 지시약으로 넣어주었는데, 이 phenol red는 pH가 7 이상일 때는 적색이고, 그 이하에서는 황색을 나타낸다.
(4) 일반적 실험방법-포도당만 예로
① 검정할 균을 glucose-phenol red broth 배지에 접종한다.
② 37■에서 배양하되 16～24시간 후, 4～5일 후 두 차례에 걸쳐 다음 사항을 조사한다.
a. 색깔 변화: 즉, 산성화(노란색), 알칼리화(붉은색) 또는 중성(변화 없음)의 판정
b. 가스의 생성여부
c. 결론적으로 발효능이 우세한지, 호흡능이 우세한지 또는 양쪽이 다 가능한지를 확인