[미생물학]Gram 양성 및 음성균의 분리

1. Introduction
자연계에는 형태, 생리적 특성, 여러 가지 종류의 물질을 생성할 수 있는 부가적 성질 등 서로 다른 미생물이 서식하고 있는데, 이 중 특정한 성질 또는 능력을 가진 균주를 순수하게 분리하여 우리가 원하는 성질이나 능력을 최대한 발휘시키는 것을 미생물의 분리라 한다.
미생물은 직접 자연에서 얻을 수도 있지만, 미생물 보존기관에서 분양 받을 수 있으며, 시료를 직접 채취할 때 분리원으로는 토양, 해수, 오니, 퇴비, 분뇨 등을 사용하고 분리 목적에 적합한 균의 생리적 특성과 생태적인 분포를 고려하여 분리원을 선택한다. 만약 목적하는 미생물의 생리적 특성을 미리 예측 할 수 있을 경우, 미생물의 영양, 온도, 산소량, 염농도, pH 등 여러 인자를 고려하여 분리조건을 결정한다.
미생물을 배양하는 방법은 크게 순수배양과 혼합배양으로 나눌 수 있다.
순수배양은 순수배양이란 미생물을 원하는 어느 한 종류만을 순수하게 키우는 것을 말한다. 순수배양법은 미생물학이 체계적인 분석적 학문으로 자리 잡는데 엄청난 공을 세운 기술로서 오늘날에는 미생물을 다루는 모든 사람들의 기본중의 기본 기술이다. 특정 세균을 분리해낼 때, 각 세균마다 증식하는 최적의 환경조건(온도, pH, 호기성, 또는 혐기성 등)이 다르다는 것을 이용한다. 혼합배양은 두 종류 이상의 균을 동시에 배양시키는 방법을 말하며 주로 용액내의 균수 측정 및 순수분리에 사용된다. 혼합배양 시 모든 균이 잘 자라는 영양배지에 우선 키운 다음, 각각 다른 균(colony)를 골라내어 다른 배지에 각각 옮겨심은 다음, 여러 선택배지에서 배양하거나 생화학적 실험을 통해 균을 분리해낸다. 이 때, 의심되는 균수를 줄일 수 있는 가장 좋은 방법이 우리가 지난 시간에 직접 해본 바 있는 gram 염색법, 그리고 이번 시간에 할 oxidase test, catalase test이다