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[생화학실험]Experimental Biochemistry I : Enzyme Kinetics

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최초등록일 2007.04.28 최종젿작일 2006.12
enzyme kinetics 효소 inhibitor inhibitory mode
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[생화학실험]Experimental Biochemistry I : Enzyme Kinetics
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    소개

    저희 학껓 조교의 주문대로 Discussion에 중점을 두며 열심히 썼습니다. (고찰 - 한 장 분량, 글자 point ; 11)
    A+ 받은 보고서이니 참고하시면 도움 되실 겁니다~

    목차

    1. 실험제목
    2. 실험일자
    3. 제출자 및 공동실험자
    4. 목적
    5. 원리
    6. 시료 및 기자재
    7. 실험방법
    8. 실험결과
    9. 고찰
    10. 참고문헌

    본내용

    9. 고찰
    이번 실험은 Michalis-Menten equation을 통하여 control condition과 inhibition condition에서의 Lineweaver-Burk plot을 그려봄으로써 주어진 inhibitor의 inhibition mode를 추정하는 실험이었다. 실험을 통하여 추정한 Km값과 Vmax값을 토대로 inhibitor의 inhibition mode왿 identity를 분석해 보면 다음과 같다.
    첫 번째 실험은 실험의 효율성을 증대시키기 위하여 가장 효과적인 enzyme unit를 선택하는 실험이었다. △A/min이 0.5에 가까운 unit이 가장 효율적이라는 조교님의 조언에 따라 0.484를 나타낸 3 unit을 선택하여 실험을 진행하였다.
    두 번째 실험과 세 번째 실험은 각각 저해제(inhibitor)를 넣지 않은 통제 조건(control condition)과 저해제를 첨가한 조건(inhibition condition)에서, 주어진 enzyme(alkaline phosphatase)의 Km과 Vmax값을 구하였다. 실험 결과의 Lineweaver -Burk plot(1/Vo vs 1/[S])을 보면 control condition과 inhibition condition의 Vmax값은 각각 0.02890과 0.02989 으로 거의 차이를 보이지 않는 반면, Km값은 130.1과 181로 inhibition condition에서 약 39.2% 증가하였음을 볼 수 있다. 이처럼 inhibitor로 인하여 substrate에 대한 enzyme의 Km값은 감소하고 Vmax값은 영향을 받지 않는 결과를 통하여 주어진 inhibitor의 inhibition mode는 ‘competitive inhibition’임을 알 수 있다.1) (중략)

    참고자료

    · 1) 생화학 실험(1) 후반부 실험교본, 제 12장
    · 2) http://soongin.new21.net/excel/mid/mid18.html - 편행 계수
    · 3) Helmward Zollner, 『Handbook of Enzyme Inhibitors, 2nd revised and enlarged edition, Part A』, Verlagsgesellschaft mbH(VCH), D-6940 Weinheim (Federal Republic of Germany), 1993, p.373～375

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