크로마토그래피의 원리왿� 종류

1. 개요
생물 조직에 관한 화학적 연구(그리스어의 bios는 생명을 뜻하므로 이 화학을 생화학 biochemistry라고 한다)에서 곤란한 점 중의 하나는 그들 조직이 방대한 수의 혼합 화합물들에 의해서 조성되어 있고 이들 화합물들은 서로가 너무나 비슷해서 따로 분리한다는 것이 거의 불가능 하다는 점에 있다.
예컨데 대단히 비슷한 색상의 화합물들이 식물의 잎에 다수 함유되어 있다. 이들에 관해서 무엇인가를 알아낸다는 것은 이들이 따로 분리되지 않는 한 불가능한데 이들을 하나 하나 분리한다는 것은 희망이 없는 일이었다. 그러나1906년에 러시아 식물학자인 Tswett는 컬럼 크로마토그래피에 의해 녹색과 노란색의 엽록체의 색소를 분리, 정제하였다. 그는 잎의 색소 혼합물을 취해 이것을 석유 에테르에 녹인 다음 석회석 가루를 빽빽하게 채운 유리관 속에 그 용액을 관통시켰다. 용매인 석유 에테르는 흘러내려 갔으나 색소는 석회석 미립자에 단단하게 달라붙어 뒤에 남게 되었다. 그러나 그는 계속해서 신선한 석유에테르를 통에 부었더니 색소가 서서히 씻겨 내려갔다. 혼합물 중에서 분리된 각 화합물은 약간씩 다른 속도로 씻겨 내려갔는데, 그것은 석회석 입자에 얼마나 단단히 붙어 있느냐왿� 석유 에테르에 얼마나 잘 녹느냐에 달려있었다.
Tswett는 초기 실험에서 원하는 높이의 컬럼을 만들기 위해 유리관속에 이눌린(inulin)을 채웠다. 잎에서 색소를 추출하고 그것을 석유에테르에 옮긴 후, 소량의 용액을 컬럼에 주입하였다. 용액이 스며들고 흡착제인 이눌린의 상층부에 좁은 시작띠가 형성되었을 때, 순수한 용매(예, 석유에테르)를 첨가하고 컬럼 상단부에 압력을 작용하였다. 용매가 컬럼을 따라 흐르면서 각각의 색소들은 다른 속도로 이동하고 결국에는 서로로 부터 분리되었다. 이러한 컬럼 크로마토그래피 방법은 다양하게 변형되어 여러 종류의 크로마토그래피를 낳았다.
어떤 특정 색소가 빨리 이동해 가느냐에 따라서 다른 것들은 상대적으로 보다 느리게 이동되며 원통 안에 하나의 분리띠(band)가 나타났다. 각 분리띠는 하나의 특정 색소를 함유했다. 그리고 각각은 빨강, 오렌지, 혹은 황색 등을 가지고 있었다.