시아노박테리아 Knock-out에 관한 실험 보고서

X Knock-out in Synechocystis sp. PCC 6803
실험 일자 : 2007. 05. 31.
1. Introduction
현재 광합성 연구에 사용되고 있는 cyanobacteria는 단세포왿� 사상체를 이루고 있는 여러 균주들이 있는데, 그 중에서도 최근에 왿�서 개발된 Synechosystis sp. PCC 6803이 광합성의 분자생물학적 혹은 분자유전학적 연구에 가장 많이 이용되고 있다. Synechosystis sp. PCC 6803은 원핵생물로 분류된 단세포 gram-negative 박테리아로, 크기는 대장균보다 약 10배 정도가 큰 구형의 생물이다. Genome의 크기는 약 2000Kb 정도이며, 세포당 genome의 수는 생장조건에 따라 약 3개에서 10개 정도 갖고 있으며, 적어도 네 개의 endogeneous plasmid를 보유하고 있다. Synechosystis sp. PCC 6803은 광합성의 분자생물학적 연구에 아주 이상적인 생물이다. 우선 다른 cyanobacteria왿� 같이 식물성 광합성을 하므로 광합성 기구들이 고등식물과 같고, 광독립영양, 광종속영양, 및 혼합영양 등의 다양한 방법으로 배양이 가능하므로 광합성의 명반응 및 암반응에 걸쳐 다양한 돌연변이들을 분리할 수 있을 뿐만 아니라, 형질전환이 아주 수월하며 recombination(homologous왿� nonhomologous)의 빈도가 높고 형질전환을 분석하기에 필요한 여러 가지 marker들이 있기 때문에 광합성의 분자생물학적 연구에 필요한 여러 조건을 잘 갖추고 있다. 위왿� 같은 Synechocystis sp. PCC 6803 특징으로 Synechocystis sp. PCC 6803에서 cloning을 통해 x gene을 target으로 Knock Out하여 x gene의 기능을 알아보는 reverse genetics을 하는 것이 실험의 목적이다.