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Plasmid DNA preparation solution-Alkaline lysis method

본 실험은 DNA 추출 시, 가장 많이 사용한다는 Alkaline lysis method를 이용(DNA 추출시, pH 차이로 인한 DNA 변성을 이용하여 genomic과 plasmid 구별해내는 원리)하여 Plasmid DNA Preparation을 실행하였다.
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최초등록일 2008.09.20 최종젿작일 2007.04
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Plasmid DNA preparation solution-Alkaline lysis method
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    소개

    본 실험은 DNA 추출 시, 가장 많이 사용한다는 Alkaline lysis method를 이용(DNA 추출시, pH 차이로 인한 DNA 변성을 이용하여 genomic과 plasmid 구별해내는 원리)하여 Plasmid DNA Preparation을 실행하였다.

    목차

    1. Introduction
    2. Materials & Methods
    3. Result
    4. Discussion
    5. Note
    reference는 각주에...

    본내용

    1. Introduction
    본 실험은 DNA 추출 시, 가장 많이 사용한다는 Alkaline lysis method를 이용(DNA 추출시, pH 차이로 인한 DNA 변성을 이용하여 genomic과 plasmid 구별해내는 원리)하여 Plasmid DNA Preparation을 실행하였다.
    유전 연구에 적합한 bacteria의 특성은 다음과 같다.
    첫째, generation time이 짧다. virus는 약 30분, 초파리는 14일, 옥수수는 1년, 사람은 약 20년의 generation time을 갖는데 비해, bacteria 중 E.coli 경우는 매 20분마다 분열가능하다.
    둘째, bacteria의 유전물질이 진핵생물의 것보다 훨씬 작고, 그 구조도 단순하다. 세균은 원핵생물의 특징을 그대로 가지고 있으며 핵막이나 미토콘드리아, 엽록체왿 같은 구조를 가지고 있지 않고, 보통 1개의 염색체를 갖고 있다(haploid). 대장균 등의 세균에는 플라스미드(plasmid)라고 하는 원형 DNA를 가지고 있다.

    플라스미드에 대해 더 자세히 알아보자.
    ① 플라스미드는 세포내에서 독립적으로 복제할 수 있는 염색체외의 유전물질(DNA)이다. 그들은 대부분의 세균에서 발견되는데 대부분은 초나선 분자로 분리되는 환상(circular) 이중가닥 DNA 분자이지만 선형의 이중가닥 분자왿 같은 다른 형태도 알려져 있다.
    ② 어떤 세균 플라스미드는 한 세포에서 다른 세포로 자신을 이동시킬 수 있어 세균 개체군 전체로 퍼진다. 어떤 플라스미드는 다른 종에 속하는 세균사이의 상호작용도 허용하는 특성을 갖는다. 플라스미드가 세균의 진화에서 행한 역할의 핵심이 바로 이동능력이다. 플라스미드에 의해 운반되는 유전자는 적대적인 환경에서 성장할 수 있는 능력을 숙주 세균에 부여하는 유전정보의 이동성 저장 장소이다. 인간과 직접 관계되는 한 예는 세균의 항생제 저항성이 흔히 플라스미드 유전자에 의해 세균에 부여된다는 것이다.

    참고자료

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