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DNA 형질전환 보고서

예비보고서로 아주 적합하며 DNA 형질전환에 대한 모든 자료를 정리 및 해석해 논 보고서입니다.
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최초등록일 2008.12.08 최종젿작일 2007.05
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DNA 형질전환 보고서
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    소개

    예비보고서로 아주 적합하며
    DNA 형질전환에 대한 모든 자료를 정리 및 해석해 논 보고서입니다.

    목차

    서론
    재료 및 방법

    결론

    본내용

    A. Plate의 제조
    Plate는 박테리아가 자랄 수 있는 최적의 환경이어야 한다. 박테리아는 plate 상에서 자라 colony를 형성하는데, 한 개의 colony는 한개의 clone으로부터 자란 것이므로 이를 분획하여 여러 실험에 사용할 수 있게 된다. Plate의 조성은 배양시 사용하는 액체 배(media)의 조성에 agar를 첨가한 것이다. 이때 첨가하는 agar의 농도는 1.5%이며, top agar왿 같은 특수한 용도로 사용하기 위해서는 agar의 농도를 변화시키기도 한다.
    실험방법
    1. Plate를 만들고자 하는 배를 만든다. 각 배의 조성은 다음과 같다.
    1) LB 배 (Luria-Bertani medium) 1 liter
    실험실에서 가장 흔히 사용되는 배이다. 위 성분 950 ml의 증류수에 녹인 후 pH를 7로 맞추기 위해 5 N NaOH를 첨가(약 200 ml)하고 증류수로 1 liter로 채운다음 autoclave한다.

    2) SOB 배1 liter
    Fresh fronzen 방법으로 competent cell 제조시에 사용하는 배이다. 950 ml의 증류수에 녹인 후 250 mM KCl 10 ml를 첨가하고 5 N NaOH를 이용하여 pH를 7로 맞춘 다음 증류수로 1 liter까지 채우고 autoclave한다. 사용하기 직전에 멸균한 2 M MgCl2를 최종농도 20 mM이 되도록 첨가하여 사용한다.

    3) M9 Minimal 배 1 liter
    M13 phage의 cloning 시에 사용할 수 있다. M9 plate를 제조하는경우는 agar 첨가 후 멸균한 배가 적당히 식었을 때 다음과 같은 것들을 넣어준 다음 plate를 만들어야 한다.

    참고자료

    · 참고 문헌
    · A. Stein,a Y. Dalal, and T. J. Fleury. 2002 December 1. Circle ligation of in vitro assembled chromatin indicates a highly flexible structure. 30(23): 5103–5109
    · J Heighway and M F Santibanez-Koref, 1989 September 12, Unexpected effects on bacterial phenotype induced by expression of a tumour-amplified human sequence 17(17): 6893–6901
    · DAVID A. MICKLOS GREG A. FREYER, DNA Science a first course, second edition, COLD SPRING HARBOR LABORATORY PRESS
    · Purves Sadava Orians Heller, Life The Science of Biology Sixth Edition, W.H.Freeman and Company
    · http://www.ambl.msl.ubc.ca/exp2.html
    · http://kin.naver.com/db/detail.php?dlid=11&dri_id=110205&eid=Yo1VLE5RQQPEPDrgw888tkd7ehnzF7q2
    · http://www.pubmedcentral.com/articlerender.fcgi?artid=265577
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