DNA전기영동실험보고서

3. 실험목적

전기영동에 대하여 이해한다.
PCR 처리를 한 DNA왿� enzyme처리를 한 DNA에 대하여 전기영동 결과를 예측하고 관찰한다.

4. 실험에 필요한 지식 및 이론

1) . 전기영동
전기영동은 전기장 안에서 하전된 입자가 양극 또는 음극 쪽으로 이동하는 현상을 말한다. 이 때 이동하는 속도는 입자의 전하량, 크기왿� 모양, 용액의 pH왿� 점성도, 용액에 있는 다른 전해질의 농도왿� 이온의 세기, 지지체의 종류 등 여러 가지 요인에 의해 결정된다. 따라서, 어떤 용액에서의 하전된 알맹이의 이동속도는 분자 자체의 성질에 따라서 결정된다. 그러므로 전기영동법은 아미노산, 뉴클레오티드, 단백질 들과 같은 하전된 물질들을 분리하거나 분석하는 데 매우 효과적인 수단으로 이용된다.

<전기이동도>
: 전기장의 세기가 1 volt/cm 일 때 어떤 입자의 이동속도


v : 입자의 이동속도, E : 전기장의 세기. q : 입자의 알짜 전하
f : 입자의 마찰 저항계수(입자의 크기왿� 모양의 함수)
D : 입자의 확산 계수, k : Boltzman상수 ,T : 절대온도
-->이동속도는 입자의 전하량 크기왿� 모양, 용액의 pH왿� 점성도, 용액에 있는 다른 전해질의 농도왿� 이온의 세기, 지지체의 종류 등 여러 가지 요인에 의해 결정

< DNA 전기 영동의 기본원리>
1) 홈이 파인 겔 만들어 DNA를 홈에 넣고 전류가 겔 사이를 흐르게함
2) DNA는 인산기로 인해 음전하를 띠므로 겔의 끝 쪽에 있는 양극을향해 이동
3) 마찰력으로 서로 다른 DNA를 분리
→ 작은 DNA조각은 용매왿� 겔 분자들로 부터 작은 마찰력을 받아 빠르게 이동.
→ 큰 DNA조각은 큰전류가 DNA조각들을 각각의 크기에 맞게 분리
(가장 큰 것은 위에 가장 작은 것은 아래)
4) 형광염료로 염색하여 자외선 하에서 봄 마찰력을 받아 천천히 움직임.